仪器设备基本信息

仪器中文名称

基因枪

生产厂商

美国BIO-RAD公司

仪器英文名称

Gene gun

生产国别

美国

仪器规格型号

PDS-1000/HE

仪器分类

基因和生命科学仪器

生产日期

购进日期

2004.06

功能和应用范围：

利用可在常温下急剧升温膨胀的高压氦气为推动剂发射高速微弹（含遗传物质或其他附着物质）直接射入细胞、组织和细胞器，适用于动植物、细胞培养物、胚胎、细菌及小型动物的转基因。

主要技术指标：

1、轰击参数

 (psi) 颗粒大小：

细菌 29 6 1,100 M5 钨
酵母菌：28 6 1,300 0.6 µm 金 

藻类：29 6 1,300 0.6 µm 金

胚芽： 28 6 1,300 1.0 µm 金 

愈伤组织或愈伤组织或 28 9 1,100 1.0 µm 金 

细胞器 28 6 1,300 0.6 µm 金

组织培养 15 3 1,100 1.6 µm 金

组织切片 25 9 1,100 1.6 µm 金

2、系统指标：

动力源： 氦气（He），惰性气体保证不污染样品

压力范围： 450，650，900，1100，1350，1550，1800， 2200 Psi，适应不同样品要求

  基因载体： 0.6, 1.0, 1.6微米直径金粉，0.4, 0.7, 1.1, 1.3, 1.7微米钨粉

  系统配件： 金粉载体；阻挡网；压力释放盘

  靶细胞距离： 3挡可调

主要用途：

适用于动植物、细胞培养物、胚胎、细菌及小型动物的转基因。

样品前处理要求：

微弹的制备：

1、EP管称取60 mg (或3mg)金粉；
2、加入1ml (或50ul)无水乙醇，振荡1min,10000rpm离心10S；

3、弃上清，加入1ml(或50ul) 无菌水洗，振荡1min,10000rpm离心10S；

4、弃上清，加入1ml(或50ul) 无菌水洗，振荡1min,-20℃；

DNA的包裹：

1、50ul金粉悬液于EP管；

2、依次加入5ul/3ul质粒DNA（1ug/ul）,50ul2.5MCaCl2 和20ul0.1M亚精胺（每加完一样可振荡     3S），静置10min；

3、振荡3S，冰上10min，10000rpm离心10S，弃上清；

4、80ul无水乙醇，震荡重悬，10000rpm离心10S，弃上清；

5、10ul无水乙醇定容（重悬）；

6、每次用10ul点于微粒载膜中央，使其平铺，晾至完全干燥，待用；

基因枪的操作：

1、打开真空泵和基因枪的电源开关；

2、打开氦气瓶阀门，旋转氦气调节杆，使气压高于所选可裂膜压力200psi左右；

3、旋下可裂膜挡盖，将可裂膜放在挡盖中央，将挡盖旋上，用专用板水平加固；

4、把微粒发射装置移出轰击室，旋下盖子，放入阻挡网，把微粒载片安装在固定槽中（有微粒的一面朝下），旋上盖子，将发射装置放回轰击室；

5、将样品盘放置在轰击室的适当位置，关上轰击室门；

6、按VAC开关(上档)抽真空，当表上读数为所需值时,开关打到HOLD（下档），然后按住FIER开关，当达到适当压力可裂膜自动破裂，松开FIER开关；

7、开关打到VENT（中间档），以释放轰击室内的真空；

8、打开轰击室门，取出样品盘；
9、取出微粒发射装置，卸下微粒载膜和阻挡网（阻挡网和微粒载膜放入70%的酒精浸泡）；

10、旋下可裂膜挡盖，清除可裂膜碎片；

11、若PDS—1000/He 型基因枪不再使用，关掉氦气瓶的主阀，按住FIER开关，按住FIE开关，放掉气体加速管内的氦气压力，最后关掉一切电源；

仪器设备相关信息

仪器负责人

孙海宏

联系电话：

0971-5312130

检测项目

基因导入

通过计量认证

所在实验室

青藏高原生物技术教育部重点实验室

电子邮箱

shh1328@16..com

检测样品

通过实验室认可

通过（）未通过（  ）

检定情况

启用日期

仪器状态信息

运行状态

正常（ ）维修（  ）停用（ √ ）

新开发功能

安放地点

农牧实验楼304室

升级改造单位

使用方式

对外开放（ ） 不开放（√）

计量校准日期

备注：